Pemekatan Ekstrak Kasar Protease Bacillus Megaterium Tr-10 Dengan Metode Pengendapan Amonium Sulfat

Vivi Mulya Harum, Salma Afifah, Suharti Suharti, Norman Yoshi Haryono, Evi Susanti

Abstract


Protease merupakan enzim yang dapat memecah ikatan peptida menghasilkan asam amino dan peptida sederhana. Protease merupakan enzim yang penting bagi industri seperti produksi kolagen. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh kejenuhan ammonium sulfat pada pemekatan ekstrak kasar protease dari B. megterium TR-10 dengan pengendapan ammonium sulfat. Tahapan dalam penelitian ini yaitu: 1) Pembuatan Media dan Reagen, 2) Peremajaan protease dari isolat Bacillus megaterium TR-10, (3) Produksi ekstrak kasar protease isolat TR-10,(4) Pemekatan ekstrak kasar protease menggunakan metode pengendapan amonium sulfat, (5) Pengujian aktivitas spesifik ekstrak kasar protease isolat TR-10 dengan metode anson, dan (6) Penentuan Homogenitas sebelum dan sesudah pengendapan. Pemekatan protease dari B. megaterium TR-10 menggunakan metode pengendapan ammonium sulfat pada tingkat kejenuhan 0-40%, 40-60% dan 60-100% belum dapat mengendapkan secara signifikan, kecuali pada tingkat kejenuhan 40-60%. Pada tingkat kejenuhan 0-40% protein tidak dapat mengendap, tingkat kejenuhan 40-60% protease dapat terendapkan dengan nilai aktivitas spesifik enzim protease sebesar 2,930 U/mg, sedangkan pada tingkat kejenuhan 60-100% protein mengendap tetapi nilai aktivitas spesifik protease nol. Uji homogenitas protease pada fraksi 40-60% mengindikasikan bahwa pada fraksi tersebut kontaminan lain dapat dipisahkan, walaupun demikian, belum memenuhi syarat untuk digunakan sebagai metode pemekatan ekstrak kasar protease B. megaterium TR-10.


Full Text:

PDF

References


Alnahdi, H. S. (2012). Isolation and screening of extracellular proteases produced by new isolated bacillus sp. Journal of Applied Pharmaceutical Science, 2(9), 71–74.

Hashmi, S., Iqbal, S., Ahmed, I., dan Janjua, H. A. (2022). Production, Optimization, and Partial Purification of Alkali-Thermotolerant Proteases from Newly Isolated Bacillus subtilis S1 and Bacillus amyloliquefaciens KSM12. Processes, 10(6).

Chusniyah, N. (2013). Isolasi Bakteri Penghasil protease dari Terasi Sidoarjo untuk Isolasikolagen dari Sisik Ikan Bandeng. Prosiding, 5(54).

Novitasari, D. P., Suharti, S., & Susanti, E. (2021). Optimization Production of Crude Extract of Protease from Bacillus megaterium TR-10 as Efforts to Support Halal Collagen Production Process. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas NegeriMalang.

Maylanda. (2019). Pengaruh Sumber Nitrogen dan pH Medium Terhadap Produktivitas Ekstrak Kasar Protease Isolat Bakteri TR-10. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Malang.

Fitria, N. (2019). Isolat TR-10: Uji Patogenesis dan Optimasi Suhu serta Waktu Inkubasi Protease dalam Mengisolasi Kolagen dari Sisik Ikan Bandeng. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Malang.

Duong-Ly, K. C., & Gabelli, S. B. (2019). Salting out of proteins using ammonium sulfate precipitation. Methods in Enzymology, 541(7), 85-94. doi: 10.1016/B978-0-12-420119- 4.00007-0.

Wardani, A. K., & Nindita, L. O. (2012). Purifikasi Dan Karakterisasi Protease Dari Bakteri Hasil Isolasi Dari Whey Tahu (Purification and Characterization of Protease from Protease-producing Bacteria Isolated from Tofu Whey). Jurnal Teknologi Pertanian, 13(3), 149-156.

Yusmaniar, Wardiyah, & Nida, K. (2017). Mikrobiologi Parasitologi. Pusdik SDM Kesehatan, Jakarta Selatan.

Soeka, Y. S., & Sulistian. (2017). Karakterisasi Enzim Protease Dari Bakteri Stenotrophomonas Sp. Asal Gunung Bromo, Jawa Timur [Characterization of Protease Enzymes of Stenotrophomonas sp. Bacteria from Bromo Mountain, East Java]. Jurnal Ilmu-Ilmu Hayati, 16(2), 203–211.

Rahayu, M., & Susanti, E. (2017). Optimasi Jenis Dan Kadar Sumber Nitrogen Serta pH Medium Untuk Produksi Protease Dari Isolat HTcUM 6.2.2 Dari Tauco Surabaya. Jurnal Kimia Riset, 2(2), 93-107.


Refbacks

  • There are currently no refbacks.